什么是MRD？

MRD有多种表述，包括微小残留病灶(Minimal Residual Disease)、可测量残留病灶（Measurable Residual Disease）和分子残留病灶（Molecular Residual Disease）。MRD概念最初来源于血液肿瘤，现已延伸应用到实体瘤，指患者经过治疗后，通过传统影像学或者常规实验室方法无法发现残留病灶，但体内仍然存在肿瘤细胞的状态。MRD是导致肿瘤复发的一个重要因素。

 

如何做MRD检测？

总的来说，MRD检测对于检测技术的敏感性具有极高的要求。以血液肿瘤为例，以下是三种MRD检测技术的对比：

	流式细胞术	PCR	NGS
检测原理	癌细胞表面抗原	PCR特异性扩增BCR/TCR重排	通过高通量测序检测所有BCR/TCR重排
检测灵敏度	0.1%-0.01%	0.01%-0.001%	0.0001%
样本要求	新鲜样本	新鲜或冻存样本均可	新鲜或冻存样本均可
标准化程度	低	高	高
优点	A)快速 B)直接定量	高灵敏度	A)超高灵敏度 B)可检测进化或新的肿瘤克隆 C)可监控免疫恢夏和重建
缺点	A)缺乏标准化 B)经验要求高 C)样本需求量大	A)通量低 B)假阳性率略高	成本略高

目前行业内将基于NGS-MRD检测的技术划分为两大类，分别是肿瘤组织依赖性的MRD检测（Tumor-informed assays）和肿瘤组织非依赖性的MRD检测（Tumor-agnostic assays）两种。

 

(1) Tumor-informed assays，即先对原发肿瘤组织进行全面的WES测序，用全血作为对照精准地排除非肿瘤来源的变异，确定患者肿瘤组织中特异的基因突变结果，然后设计个性化Panel，连续监测患者的血浆cfDNA是否有出现肿瘤组织中存在的这些突变。这个技术目前在全世界是主流，国内华大基因公司引进的Signatera技术就是这种。这种技术的优点是能够追踪原发肿瘤中出现的突变，比较精准，捕获区域比较小，可以做比较深的测序。缺点是由于肿瘤异质性，可能会遗漏掉肿瘤转移以后产生的新突变，且需要在短时间内设计、制备患者个性化的Panel，检测耗时比较长，费用比较贵。 

 

(2) Tumor-agnostic assays，不依赖于原发肿瘤组织，通过一组预先选择与癌种相关的基因，设计固定Panel，检测患者血浆cfDNA是否含有这些基因上的突变。这种技术的优点是无需获取患者的肿瘤组织，直接可以检测血液样本。缺点是固定Panel比较大，测序不容易测得很深。由于我们并不知道原发组织中有什么样的基因突变，因此血液中出现的突变具体是怎样的含义不是十分清楚。

 

 

下图是两种技术路线的比较：

技术路线	Tumor-informed assays	Tumor-agnostic assays
检测过程&panel	先测肿瘤组织，进行个性化定制，再测ctDNA	基于固定Panel的血浆ctDNA检测
检测位点&测序深度	覆盖位点相对少(Pane小)，超高深度	覆盖位点相对多(Panel大)，中高深度
主要优势	更高灵敏度,更高准确性	无需获取肿瘤组织
主要劣势	需要获取肿瘤组织；流程复杂，某些患者取样困难；成本相对较高	灵敏度较低，假阳性率较高；成本相对较低

目前这两种技术均处在探索阶段，需要前瞻性研究确定其敏感性、特异性和预测价值。