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CRISPR sgRNA定制文库

sgRNA文库——高通量功能基因筛选

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概述

 

CRISPR-Cas9系统是基因编辑的有力工具,通过设计不同序列的向导RNA靶向目标DNA序列,几乎能够对任意基因进行编辑。由于靶向灵活,编辑效率高,操作简便等特点,自发现以来被广泛应用于基因功能研究,基因工程和生物医药领域。

相较于对单个基因组位点进行编辑,sgRNA文库通常包含数千至数十万个不同的sgRNA。在CRISPR筛选实验中,将这个文库转染到目标细胞后,通过表型筛选,再结合NGS分析,可以成功筛选出目标基因。sgRNA文库的优点在于,它可以根据实验需求,对特定类别的基因或全基因组进行序列设计,这一特点使其成为一种不受序列、细胞或物种限制的高通量基因功能研究工具。

 

 

sgRNA文库进行筛选实验流程图

sgRNA文库进行筛选实验流程图

 

 

应用领域

1, 功能基因组学研究:利用sgRNA文库,可以对大规模基因进行敲除和功能筛选,深入探究基因功能和相互作用。

2, 基因敲除研究:通过sgRNA文库中的序列,可以针对特定基因或基因家族进行敲除研究,以了解其在细胞生长、分化、代谢等方面的作用。

3, 表型筛选:利用sgRNA文库,可以快速筛选出与某些疾病表型及性状相关的基因,为疾病诊断和治疗提供依据。

4, 药物研发:通过sgRNA文库,可以筛选出药物作用的靶点,为新药研发提供候选靶点。

5, 基因组编辑:sgRNA文库可以用于基因组的编辑和修饰,为基因治疗和遗传疾病的干预提供技术支持。

 

 

迪赢sgRNA定制文库

一旦确定了目标基因和相应的sgRNA序列,迪赢通过自主研发的高通量合成平台合成定制的寡核苷酸池。此后,寡核苷酸经过扩增,可以有效地克隆到适当的慢病毒表达载体骨架中。所得的质粒库可以包装成慢病毒颗粒,用于在任何选择的细胞系中进行基因筛选。

文库构建包括序列合成,扩增及序列克隆到质粒。交付质粒可直接用于病毒包装。

 

 

sgRNA流程图

 

服务特色

 

 

交付内容

● 文库菌液及抽提质粒。

● 100个克隆的桑格测序结果,空载率<10%,完全正确率>70%。

● NGS文库质检结果报告,覆盖率>99.5%,分布斜率Skew Ratio <10。

 

迪赢合成—生命科学“核”动力

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