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QuarCam 无缝克隆试剂盒plus

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概述

QuarCam Plus Seamless Cloning Kit是基于Gibson Assembly原理,针对多片段重组反应进行了优化,可以一次实现 1-12个插入片段(长度 50 bp-12 kb)的无缝拼接克隆。该试剂盒优化了重组酶及缓冲体系,添加了独特的重组增强因子,使得单片段和多片段重组效率同样高效;同时也提高了重组体系对杂质的耐受度,使得线性化载体与插入片段可以不纯化直接用于重组反应,极大的简化了实验步骤。

图片1

无缝克隆原理示意图

 

产品特点

 

 

文章有奖征集活动

 

如发表的文章/论文中注明无缝克隆相关产品来自上海迪赢生物科技有限公司 (DynegeneTechnologies Co.Ltd),可将电子版文章/论文发给迪赢销售或者技术支持,审核通过后,会按照发文章奖励规则发放相应奖励。

 

兼容单片段、多片段同源重组

图1. 插入1个和多个片段的阳性克隆鉴定结果

 

使用QuarCam Plus Seamless Cloning Kit分别进行1个和多个片段的重组实验,结果显示可兼容一个或者多个目标片段的插入连接。(A)带有重组质粒的大肠杆菌细胞在抗性平板上的生长情况。(B)插入1个片段的菌落PCR琼脂糖凝胶电泳检测结果。(C)插入4个片段的菌落PCR琼脂糖凝胶电泳检测结果。 (D)插入10个片段的菌落PCR琼脂糖凝胶电泳检测结果。

 

克隆阳性率高

 

重组体系

插入片段个数

克隆子总数(个)

菌落PCR阳性率

测序阳性率

总阳性率

迪赢 插入1个片段 988 24/24 (100%) 23/24 (96%) 96%
插入4个片段 349 22/24 (92%) 18/22 (82%) 75%
插入10个片段 336 20/24 (83%) 16/20 (80%) 67%
公司A 插入1个片段 920 24/24 (100%) 22/24 (92%) 92%
插入4个片段 286 18/24 (75%) 13/18 (72%) 54%
插入10个片段 90 12/24 (50%) 6/12 (72%) 25%

 

表1. 插入1个或多个片段的阳性克隆子统计

 

使用迪赢和友商产品分别进行1个、4个和10个片段的重组实验,重组产物转化平板后,分别从各自平板挑取24个克隆进行菌落PCR,琼脂糖凝胶电泳显示片段大小正确为阳性;挑取菌落PCR阳性克隆进行一代测序,重组区序列完全正确为阳性。结果显示不管是单片段还是多片段的重组实验 ,其阳性率均优于友商。

 

订购和规格

 

产品名称

货号

规格

描述

QuarCam Plus Seamless Cloning Kit NG1002A / NG1002B 10rxn / 50rxn 适用1-12个片段
QuarCam  Seamless Cloning Kit NG1001A / NG1001B 10rxn / 50rxn 适用1-5个片段

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