杂交捕获(Hybridization Capture)是一种广泛应用于高通量测序(NGS)技术中的实验方法,它利用特异性探针与目标DNA区域的杂交作用,捕获并富集感兴趣的目标序列。随着NGS技术的快速发展,杂交捕获已成为靶向测序的重要手段,尤其在基因组学、癌症研究、遗传变异分析等领域中具有广泛的应用。
杂交捕获的工作原理
杂交捕获技术基于DNA分子之间的互补配对原理。其基本流程包括设计特异性的探针与目标DNA序列结合,随后通过一系列的步骤将这些目标序列富集出来,为后续的高通量测序提供可靠的材料。
杂交探针设计
杂交捕获的核心在于探针的设计。探针是具有特定序列的寡核苷酸或核酸片段,它们与目标区域的DNA序列互补,通过氢键相互结合。根据需要捕获的目标区域,设计者需要合成能够覆盖目标区域的探针,通常这些探针是针对基因组中某些特定基因或序列的短片段。
探针的设计通常考虑以下几个因素:
- 目标区域的长度与复杂性:确保探针能够高效捕获目标区域。
- 探针的GC含量:高GC含量的区域可能需要更高的温度条件才能稳定杂交。
- 非特异性结合的最小化:设计时应避免与非目标区域的DNA序列发生不必要的结合。
杂交捕获实验流程
杂交捕获实验主要包括以下几个关键步骤:
1. 目标DNA片段的片段化:首先通过物理或化学方法将整个DNA样本打断为较小的片段。
2. 捕获探针的设计与合成:根据目标区域的序列信息,设计合适的探针,这些探针通常是带有一定修饰的寡核苷酸。
3. DNA与探针的杂交:将片段化的DNA与探针混合,在合适的温度下进行杂交,目标序列与探针结合形成复合物。
4. 富集捕获区域:利用捕获探针与目标序列的特异性结合,进行磁珠或其他固相材料的捕获。探针通常被附着在磁珠或其他支持物上,这样可以利用磁场或过滤等物理方法将特异性结合的目标区域从其余的DNA片段中分离出来。
5. 洗脱与测序:最终将捕获到的目标序列从探针上洗脱下来,然后用于后续的高通量测序。
杂交捕获技术的优势
- 高通量与高特异性:通过选择性捕获目标序列,可以极大提高测序深度,从而提高对低丰度突变或变异的检测灵敏度。
- 降低成本:相比全基因组测序,杂交捕获技术通过富集特定的靶序列,大大减少了测序的所需数据量,从而降低了实验成本。
- 多样性与灵活性:可以根据研究需求设计多种不同的目标区域,为疾病相关基因、已知突变、遗传多样性等研究提供强有力的支持。
迪赢生物提供的杂交捕获试剂和杂交捕获探针产品,结合了高效的捕获原理和卓越的合成技术,具有显著的技术优势。无论是基因组学研究还是临床诊断,迪赢的产品都可以提供高质量的实验保障。
迪赢杂交捕获试剂
迪赢的杂交捕获试剂包括一系列高效的缓冲液、试剂盒和优化配方,专为高效捕获DNA目标区域设计。它们适用于各种高通量测序平台(如Illumina、MGI等),支持多样的实验需求。
产品特点
- 优化缓冲体系:确保在广泛的实验条件下都能实现高效的目标序列富集。
- 高兼容性:支持不同类型的捕获试剂和测序平台,满足多样化的实验需求。
- 简化操作流程:简化实验操作步骤,减少杂交和富集过程中的非特异性结合,提高实验效率。
- 高精度和高特异性:确保对目标区域的捕获效率和准确度,最大化测序数据的利用率。
迪赢杂交捕获探针
迪赢的杂交捕获探针具有极高的灵敏度和准确性,适合不同大小和复杂度的目标区域富集。探针可以根据用户需求进行定制设计,确保覆盖目标区域的多样性和特异性。
产品特点
- 定制化服务:可以根据具体的目标序列设计和合成专属探针,满足个性化需求。
- 高均一性:确保捕获过程中探针的均一性,减少非特异性结合和背景噪音。
- 高灵敏度:能够高效富集低丰度的靶序列,适用于多种应用场景,包括癌症突变、遗传病筛查等。
杂交捕获技术的应用
杂交捕获技术广泛应用于以下领域:
- 癌症研究:通过富集与癌症相关的基因突变或重排,帮助揭示癌症的分子机制。
- 基因组学:对于特定的基因组区域进行捕获富集,用于研究基因的变异、突变或多态性。
- 遗传病研究:富集目标基因区域,用于发现与遗传疾病相关的突变。
- 病原体检测:用于富集特定病原体基因组区域,进行高效的病原体测序与分析。
杂交捕获作为一项成熟的高通量测序技术,不仅具有高特异性和高灵敏度,还能有效降低测序成本,广泛应用于基因组学、癌症研究、遗传病诊断等领域。通过选择适合的杂交捕获试剂和探针,实验者可以更加高效地进行目标区域富集,从而获得更准确的研究结果。
迪赢生物提供的高质量杂交捕获试剂和定制化杂交捕获探针服务,能够为各类研究提供全方位的技术支持,帮助您更好地开展实验并获取高质量的数据。