QuarCam Plus Seamless Cloning Kit (Ready Mix)是基于Gibson Assembly原理,将优化的重组增强因子预混进重组试剂中,可以实现1-12个插入片段(长度50 bp-12 kb)的高效无缝拼接克隆。同时也提高了重组体系对杂质的耐受度,使得线性化载体与插入片段可以不纯化直接用于重组反应,极大的简化了实验步骤。
主要优势
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兼容多片段
可兼容1-12个目标片段(长度50bp-12kb)的插入连接,克隆数多,阳性率高。
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操作更便捷
一管式反应,线性化载体与插入片段可以不纯化直接用于重组反应。
数据
克隆阳性率高,兼容多片段同源重组
QuarCam Plus Seamless Cloning Kit (Ready Mix),NG1005是将优化的重组增强因子预混进重组试剂中。分别使用NG1005、常规Gibson试剂和国外友商试剂进行多片段组装实验,重组产物转化平板后,挑取克隆进行菌落PCR,琼脂糖凝胶电泳显示片段大小正确为菌落PCR阳性;挑取菌落PCR阳性克隆进行一代测序,重组区序列完全正确为阳性。结果显示增加了增强因子的NG1005,克隆阳性率有较大的提升,其阳性率优于友商。
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各类组装体系的正确组装比例(菌落PCR检测)
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| 体系 |
Gibson+Enhance(10kb分10段,1kb/段) |
| 样品 |
克隆子正确率 |
空载率%(蓝斑/总菌数) |
| 常规Gibson |
60%(6/10) |
64.5%(82/127) |
| N* |
80%(8/10) |
77.9%(92/118) |
| NG1005 |
90%(9/10) |
29.6%(40/135) |
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各类组装体系的正确组装比例(荧光检测)
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| 体系 |
Gibson+Enhance(1.5kb分10段,170bp/段) |
| 样品 |
荧光菌数/总菌数 |
克隆子正确率 |
| 常规Gibson |
322/354 |
90.9%(322/354) |
| N* |
168/189 |
88.9%(168/189) |
| NG1005 |
208/217 |
95.8%(208/217) |
订购规格
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产品名称
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货号
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规格
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QuarCam Plus Seamless Cloning Kit (Ready Mix)
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NG1005A / NG1005B
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10rxn / 50rxn
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