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DNA无缝克隆(Ready Mix)试剂盒

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概述

QuarCam Plus Seamless Cloning Kit (Ready Mix)是基于Gibson Assembly原理,将优化的重组增强因子预混进重组试剂中,可以实现1-12个插入片段(长度50 bp-12 kb)的高效无缝拼接克隆。同时也提高了重组体系对杂质的耐受度,使得线性化载体与插入片段可以不纯化直接用于重组反应,极大的简化了实验步骤。

 

主要优势

 

数据

 

克隆阳性率高,兼容多片段同源重组

QuarCam Plus Seamless Cloning Kit (Ready Mix),NG1005是将优化的重组增强因子预混进重组试剂中。分别使用NG1005、常规Gibson试剂和国外友商试剂进行多片段组装实验,重组产物转化平板后,挑取克隆进行菌落PCR,琼脂糖凝胶电泳显示片段大小正确为菌落PCR阳性;挑取菌落PCR阳性克隆进行一代测序,重组区序列完全正确为阳性。结果显示增加了增强因子的NG1005,克隆阳性率有较大的提升,其阳性率优于友商。

 

 

各类组装体系的正确组装比例(菌落PCR检测)

体系  Gibson+Enhance(10kb10段,1kb/
样品 克隆子正确率 空载率%(蓝斑/总菌数)
常规Gibson  60%(6/10) 64.5%(82/127) 
N*  80%(8/10)  77.9%(92/118) 
NG1005  90%(9/10)  29.6%(40/135)

 

 

各类组装体系的正确组装比例(荧光检测)

体系  Gibson+Enhance(1.5kb分10段,170bp/)
样品 荧光菌数/总菌数  克隆子正确率
常规Gibson  322/354  90.9%(322/354)
N*  168/189 88.9%(168/189)
NG1005   208/217  95.8%(208/217)

 

 

订购规格

产品名称

货号

规格

QuarCam Plus Seamless Cloning Kit (Ready Mix)

NG1005A / NG1005B  

10rxn / 50rxn

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